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多元醇類(lèi)凍干保護(hù)劑包括甘油、甘露醇、山梨糖醇、肌醇、木糖醇、叔丁醇、側(cè)金盞花醇等,這一類(lèi)凍干保護(hù)劑是比較常用較為普遍的凍干保護(hù)劑。以甘油作為凍干保護(hù)劑來(lái)介紹一下在蛋白質(zhì)凍干中的作用。甘油具有良好的滲透能力,可以進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部和胞內(nèi)大分子形成氫鍵以取代干燥脫除的水分,從而維持蛋白質(zhì)、碳水化合物及脂肪等大分子活性物質(zhì)的原有結(jié)構(gòu)。此外,甘油還可以起到降低細(xì)胞脫水皺縮和緩解復(fù)水腫脹的效果。另外醇和糖類(lèi)相似均具有醇和糖類(lèi)羥基官能團(tuán),均能產(chǎn)生“優(yōu)先水化作用”以及改變體系的玻璃態(tài)轉(zhuǎn)變溫度等,...
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二糖又名雙糖,雙糖是碳水化合物的一種。它是由兩個(gè)單糖分子經(jīng)縮合反應(yīng)除去一個(gè)水分子而成的糖。例如乳糖由葡萄糖和半乳糖組成,蔗糖由葡萄糖和果糖組成,麥芽糖由兩個(gè)葡萄糖組成等。二糖作為常用的凍干保護(hù)劑,能夠有效增加蛋白凍干穩(wěn)定性,但是用它們作保護(hù)劑得到的無(wú)定形蛋白凍干固體具有較低的Tg,對(duì)儲(chǔ)存過(guò)程中的高溫和高濕條件耐受較差。大分子量糖能夠增加凍干后固體的Tg,增加凍干后穩(wěn)定性,但是對(duì)于低濃度蛋白活性保護(hù)作用不理想。例如蔗糖對(duì)蛋白質(zhì)具有保護(hù)作用,葡聚糖在冷凍和干燥過(guò)程中不能防止蛋白質(zhì)...
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聚合物又稱(chēng)加聚物。由一種單體經(jīng)聚合(加聚)反應(yīng)而成的產(chǎn)物。分子具有重復(fù)的結(jié)構(gòu)單位。包括晶態(tài)結(jié)構(gòu)、非晶態(tài)結(jié)構(gòu)、取向態(tài)結(jié)構(gòu)以及織態(tài)結(jié)構(gòu)。聚合物包括聚乙二醇、PVP、明膠、聚乙烯亞胺等。聚合物常用作為蛋白質(zhì)的冷凍保護(hù)劑,通常聚合物的穩(wěn)定作用取決于聚合物的多重性質(zhì),如優(yōu)先從蛋白質(zhì)表面析出、表面活性、使蛋白質(zhì)溶液私度升高從而阻止其他小分子(如糖及多輕基化合物)的結(jié)晶、抑制冷凍過(guò)程中pH值的劇烈變化等。不同聚合度及濃度的聚合物所提供的保護(hù)作用不同,如聚合度大的PvP有著較高的玻璃化溫度,...
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氨基酸是含有氨基和羧基的一類(lèi)有機(jī)化合物的通稱(chēng)。目前發(fā)現(xiàn)的天然氨基酸就有300多種,基本氨基酸也有二十個(gè)品鐘。氨基酸應(yīng)用于食品行業(yè)、醫(yī)藥行業(yè)、化妝品行業(yè)等。氨基酸是常見(jiàn)的蛋白質(zhì)保護(hù)劑之一。在冷凍過(guò)程中,低濃度的甘氨酸可通過(guò)抑制10或100mmol/L磷酸緩沖鹽結(jié)晶所致pH值的改變而阻止蛋白質(zhì)藥物變性。無(wú)定型甘氨酸可阻止凍干過(guò)程中重組人生長(zhǎng)激素的聚集;結(jié)晶型甘氨酸能升高成品的塌陷溫度,阻止因塌陷而引起的蛋白質(zhì)藥物的破壞。常用的氨基酸類(lèi)蛋白質(zhì)保護(hù)劑有脯氨酸、谷氨酸鈉、丙氨酸、甘氨酸...
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熒光PCR的探針?lè)ǚ譃槿蚪M核酸探針、克隆探針、寡核苷酸探針、單鏈RNA探針、cDNA探針、蛋白質(zhì)探針以及酶探針。帶大家一起了解下寡核苷酸探針、cDNA探針、RNA探針的特點(diǎn)。寡核苷酸探針特異性較高,區(qū)別染色體上一個(gè)堿基的突變;由于其鏈短,分子量小,雜交時(shí)間較短(僅需1-2小時(shí)),可預(yù)測(cè)雜交條件,可直接利用DNA序列人工合成獲得特異片段而無(wú)需分子克隆,獲得探針相對(duì)容易。但是由于其鏈短致使標(biāo)記率較低,也影響了檢測(cè)的敏感性,僅能檢出含很少的標(biāo)本。cDNA探針以RNA為模板,用反...
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二甲基亞砜(DMSO)是一種有機(jī)化合物,常溫下為無(wú)色無(wú)臭的透明液體,是一種吸濕性的可燃液體。具有高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性好、與水混溶的特性??勺饔袡C(jī)溶劑、反應(yīng)介質(zhì)和有機(jī)合成中間體。也可用作合成纖維的染色溶劑、去染劑、染色載體,以及回收乙炔、二氧化硫的吸收劑。二甲基亞砜是一種既溶于水又溶于有機(jī)溶劑。廣泛用作溶劑和反應(yīng)試劑,具有很高的選擇抽提能力。二甲基亞砜是如何應(yīng)用的呢?下面簡(jiǎn)單介紹下,DMSO是一種重要的滲透型細(xì)胞保護(hù)劑。培養(yǎng)液中DMSO濃度為10%時(shí),細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率近100%;1‰...
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甲酰胺是一種化合物,無(wú)色透明液體,略有氨味,是合成醫(yī)藥、香料、染料等的原料,也可作為溶劑用于合成纖維的抽絲、塑料加工、木質(zhì)酪素墨水的生產(chǎn)等。通過(guò)甲酸甲酯和氨的反應(yīng)制備甲酰胺的方法。甲酰胺是可作為溶劑、有機(jī)合成原料、醫(yī)藥原料等的在工業(yè)上有用的物質(zhì)。甲酰胺是被較早發(fā)現(xiàn)并應(yīng)用的PCR凍干保護(hù)劑之一,能促進(jìn)引物模板退火,能提高PCR反應(yīng)的特異性。分享下熒光PCR試劑凍干的示例:(1)將熒光PCR擴(kuò)增緩沖液、引物、探針、熱啟動(dòng)Taq酶、UNG酶、dATP、dGTP、dCTP、dTTP、...
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聚乙烯吡咯烷酮簡(jiǎn)稱(chēng)PVP,是一種非離子型高分子化合物,是N-乙烯基酰胺類(lèi)聚合物中被研究得深、廣泛的精細(xì)化學(xué)品品種。應(yīng)用于醫(yī)藥、化妝品、食品等行業(yè)??勺稣澈蟿?、增溶劑、分散或共研磨劑、活性成分穩(wěn)定劑等。PVP按其平均分子量大小分為四級(jí),用K值表示,K值實(shí)際上是與PVP水溶液的相對(duì)粘度有關(guān)的特征值,而粘度又是與高聚物分子量有關(guān)的物理量,一般K值越大,其粘度越大,粘接性越強(qiáng)。熒光PCR凍干時(shí),PVP能夠增強(qiáng)PCR產(chǎn)物生成量,其中PVP也能有效提高PCR效率和特異性。PVP作為PCR...
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